Etablierung des Einsatzes von formalin-fixiertem paraffin-eingebettetem Gewebe (FFPE-Gewebe) zur Antikörper-Selektion mittels der Phage-Display-Methode am Beispiel des kleinzelligen Bronchialkarzinoms (SCLC)

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Das kleinzellige Bronchialkarzinom (SCLC) zeigt eine frühe Metastasierung und einen aggressiven Verlauf mit einer 2-Jahres-Überlebensrate von unter fünf Prozent. Monoklonale Antikörper werden zunehmend als spezifische Therapeutika in der Behandlung maligner Erkrankungen eingesetzt, jedoch blieben Erfolge beim SCLC bislang aus. In dieser Arbeit wird die Phage-Display-Technologie als effektives in vitro Herstellungsverfahren für Antikörper genutzt. Diese Methode basiert auf der Expression funktioneller Antikörperfragmente auf Bakteriophagen, die nach ihrem Antigen-Bindungsverhalten isoliert werden können. Anstelle von Zelllinien oder gereinigten Antigenen, die nicht in ihrer natürlichen Umgebung vorliegen, wurden Selektionen auf FFPE-Gewebeschnitten durchgeführt. Dieses Material stammt aus der Routinediagnostik und verursacht keine zusätzliche Belastung für die Patienten. Verschiedene Antigendemaskierungsverfahren wurden eingesetzt, um die Immunogenität der Epitope zu erhöhen. Anschließend wurden scFv-Antikörper-Bibliotheken auf gesundem Lungengewebe depletiert, um tumorirrelevante Antikörper zu entfernen, bevor die Selektion auf SCLC-Gewebe erfolgte. Dadurch konnten vier Antikörper isoliert werden, deren SCLC-Spezifität mittels ELISA und Durchflusszytometrie auf drei SCLC-Zelllinien bestätigt wurde. Die Selektion auf Gewebeschnitten ermöglicht die effektive Gewinnung patientenspezifischer Antikörper, deren diagnostisches oder t